豬流感（Swine influenza, SI）是一種急性、高度接觸性傳染病，至今仍在全球范圍內(nèi)不斷流行。該病在在臨床上多表現(xiàn)為突發(fā)性咳嗽、高熱、嗜睡、厭食、流鼻液、呼吸困難和體重下降等癥狀，具有發(fā)病率高而死亡率低的特征。

近年來，豬流感在我國各地發(fā)病較為常見，且對不同年齡段的豬只均可造成不同程度的侵害，尤其是體重較大的育肥豬在流行季節(jié)發(fā)病率可高達100%，但死亡率僅4%左右。該病主要嚴重影響豬的生長發(fā)育，導致豬的肉料比明顯降低，種豬一旦患病可影響其生產(chǎn)性能，給養(yǎng)豬場帶來巨大的經(jīng)濟損失。

豬流感的病原—豬流感病毒（Swine influenza virus,  SIV）是一種球狀結(jié)構(gòu)的單股負鏈RNA病毒，隸屬正粘病毒科，流感病毒屬。其病毒粒子具有包含HA（血凝素）、NA（神經(jīng)氨酸酶）和M2等蛋白的囊膜結(jié)構(gòu)，囊膜內(nèi)部為核衣殼結(jié)構(gòu)，其中包含核蛋白NP、核蛋白復合物RNP以及PA、PB1、 PB2多聚酶蛋白。豬流感病毒的基因組由八個獨立的RNA片段組成，依次為PB2、 PB1、PA、HA、NP、NA、NS和M。

我國針對豬流感病毒的病原學和血清學監(jiān)測己經(jīng)進行了十余年，且多種亞型（如H1N1、H1N2、H3N1、H3N2和H2N3亞型等）都己被檢測出來，而H1N1、H1N2和 H3N2 亞型是當前豬流感的主要流行毒株，其中A型流感病毒H1N1亞型對豬的感染流行最為廣泛。

SIV因其毒株多樣、感染途徑繁雜，且無特效治療藥，因此很難達到理想的預(yù)防和治療效果，目前，臨床上主要采取接種疫苗的方式來實現(xiàn)對該病的預(yù)防。

在歐洲和美洲，以H1N1、H3N2或H1N2豬流感病毒為基礎(chǔ)的滅活全病毒佐劑疫苗，是目前市場上可以購買到的主要豬流感商業(yè)疫苗。

為了克服疫苗免疫時母源抗體的干擾，激發(fā)動物機體最廣泛的免疫反應(yīng)，人類從未停止對疫苗新品或新型疫苗的研究。目前，多種SIV新型疫苗研制己初步獲得成功并且通過了實驗室測試，但真正投入市場仍需時日。

一、滅活疫苗

迄今，滅活疫苗是應(yīng)用最廣泛且技術(shù)最成熟的豬流感疫苗，主要是油佐劑乳化的全病毒滅活疫苗，有單價苗和雙價苗。接種豬流感全病毒滅活疫苗后，它能刺激豬只機體產(chǎn)生特異性HA抗體。HA抗體能阻斷流感病毒與宿主細胞上的唾液酸受體結(jié)合，從而阻止病毒的入侵，在免疫保護中發(fā)揮重要作用。目前，市售的SIV滅活疫苗主要通過雞胚和細胞培養(yǎng)生產(chǎn)得到，疫苗制作過程中，既要求疫苗候選株能在雞胚中高水平繁殖，同時要求其具有良好的免疫原性。為了與豬流感流行株的抗原性和遺傳系譜盡可能保持一致，每個地區(qū)都會根據(jù)當?shù)亓餍星闆r，篩選田間株用于疫苗生產(chǎn)。豬流感全病毒滅活疫苗接種途徑一般是豬只頸部肌肉。初次免疫后的豬只，隔2～4周再行加強免疫1次。針對母豬，首選的免疫方法是，在配種前，每季度或者分娩前3～6周，對初產(chǎn)母豬免疫2次。當母豬體內(nèi)SIV的抗體滴度比較高時，無論是由于接種疫苗刺激產(chǎn)生，還是由于感染SIV導致的，為了避免母源抗體的干擾，仔豬的SIV疫苗免疫應(yīng)當推遲到12～16周齡。

二、重組蛋白疫苗

已有多次報道，小鼠接種M2和NP蛋白后，能抵抗強致病性的流感病毒的感染。

這些發(fā)現(xiàn)為通用流感疫苗的研究奠定了基礎(chǔ)和提供了研究方向。最近，Loeffen等已構(gòu)建出一種可溶性的重組HA三聚體（來源于A/California/04/2009的HA）。因為HA三聚體更接近自然條件下的HA蛋白，而且能夠誘導動物機體產(chǎn)生更高滴度的中和抗體，所以作為疫苗候選抗原，HA三聚體應(yīng)該比HA單體更有優(yōu)勢。用這HA三聚體2次肌肉注射免疫豬群，免疫3周后經(jīng)滴鼻接種2009 pH1N1病毒進行攻毒保護實驗。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，免疫接種后的豬只體內(nèi)HA中和抗體滴度達到較高水平。產(chǎn)生的抗體不僅能夠抵抗2009 pH1N1病毒，而且能夠抵抗類歐亞類禽、豬流感H1N1病毒的感染，不過不能抵抗H1N2病毒。HA三聚體幾乎能夠完全阻斷病毒在呼吸道上的復制及向外界排毒。

三、載體疫苗

雖然載體疫苗可能無法刺激動物機體產(chǎn)生顯著的效應(yīng)T淋巴細胞（cytotoxic Tlymphocytes，CTL）反應(yīng)，但是將流感病毒的某些基因重組到病毒載體后，所表達出的流感病毒重組蛋白能夠安全地誘導體液免疫和細胞免疫應(yīng)答。人腺病毒5型（hAd5）載體己經(jīng)被用于表達H3N2型SIV（sw/Texas/98）的HA基因。小鼠免疫重組載體疫苗（hAd5/ HA）后，只能部分抵抗A/Hong Kong/1/68 (H3N2) 。隨后，又構(gòu)建了hAd5與sw/Texas/98（H3N2）的NP基因重組載體疫苗，用此重組載體疫苗肌肉注射免疫豬只一次，在免疫后的第28d，就能檢測到高滴度的病毒特異性NP抗體。滴鼻接種與sw/Texas/98（H3N2）高度相似的H3N2病毒后，免疫組豬群能完全抵抗病毒攻擊，未發(fā)現(xiàn)向外排毒和臟器病變。

四、DNA疫苗

DNA疫苗是一種通過基因工程技術(shù)改造的裸DNA質(zhì)粒，在轉(zhuǎn)染細胞中能產(chǎn)生特定抗原進而激發(fā)宿主免疫應(yīng)答的疫苗。細胞內(nèi)的抗原能被I型和II型MHC分子識別，從而刺激機體產(chǎn)生相應(yīng)的體液免疫和細胞免疫，包括細胞毒性T細胞為主體介導的特異殺傷細胞反應(yīng)（CTL反應(yīng)）。這個穩(wěn)定的DNA質(zhì)粒能夠比較容易地進行大規(guī)模生產(chǎn)，且成本低。目前，己經(jīng)研制出針對人流感病毒和禽流感病毒的DNA疫苗，實驗證明它們在雪貂、馬、小鼠、雞以及非靈長類動物體內(nèi)能誘發(fā)強大的免疫反應(yīng)。

不過，關(guān)于DNA疫苗的使用，也存在一些爭議。有些專家學者認為：這些DNA疫苗有可能會整合到宿主的基因上，增加惡性腫瘤的風險，并且會誘導機體產(chǎn)生自身抗體來抵抗DNA疫苗從而導致自身免疫性疾病。所以研究更有效、更安全的DNA疫苗將是科學技術(shù)以及獸醫(yī)臨床用藥的一個重大挑戰(zhàn)。

五、基于豬流感M2e蛋白流感疫苗

目前也有很多關(guān)于M2e蛋白高度保守的報道，并且己經(jīng)報道出一些基于M2e基因的“通用疫苗’。但是研究發(fā)現(xiàn)，M2e本身只有24個氨基酸，其自身的免疫原性較低，所以常常靠增加其拷貝數(shù)或融合一些疫苗佐劑來增強疫苗的免疫效果。試驗證實，多分子拷貝數(shù)的M2e免疫原性明顯增強。

目前以流感病毒M2e基因為抗原靶標的高效疫苗仍處于試驗開發(fā)階段，隨著研究的不斷深入，相信不久以后，以M2e為靶標的流感疫苗將實現(xiàn)對不同亞型流感病毒的免疫保護作用，有望降低豬群流感病毒的感染幾率。